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更新時(shí)間:2024-11-04
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
尿道組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7263 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠輸尿管上皮分離自輸尿管組織;輸尿管上接腎盂,下連膀胱,是一對(duì)細(xì)長(zhǎng)的管道,呈扁圓柱狀,位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進(jìn)入骨盆。輸尿管有三個(gè)狹窄部:一個(gè)在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處);一個(gè)在越過(guò)小骨盆入口處;最后一個(gè)在進(jìn)入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu),即瓦耳代爾鞘,它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段,也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中,腹段自腎盂輸尿管交界處,到跨越髂動(dòng)脈處;盆段,自髂動(dòng)脈到膀胱壁;膀胱段,自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開(kāi)口。輸尿管管壁分為4層,黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮,約有4-5層細(xì)胞;固有層由細(xì)密的結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維;輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成;外膜為疏松結(jié)締組織,營(yíng)養(yǎng)血管由外膜進(jìn)入輸尿管。其中,輸尿管上皮細(xì)胞主要分布于黏膜層。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠輸尿管上皮采用先消化、然后機(jī)械分離法使輸尿管分層、最后膠原酶消化,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠輸尿管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體 1(VEGF-R3) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) R&D
sVE-Cadherin 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
小鼠 ACTH(mouse ACTH) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) Phoenix
mouse Activin A 作用: ELISA 規(guī)格: 96T
小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human Coxsackie virus IgM (Cox V-IgM) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgM(Cox V-IgM)試劑盒
HumanHirudinELISAKit 人水蛭素(Hirudin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor8-epi-PGF2Alpha(Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha)ELISAKit兔8-異構(gòu)前列腺素
銀染法細(xì)胞端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次
MouseMethemoglobin,MHBELISAKit小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒規(guī)格:96T/48T
胞漿蛋白PACSIN3抗體
RhoA重組兔單克隆抗體
GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein
NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受體2C(多肽)
CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein
CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白
GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白
NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受體2C(多肽)
CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白
GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein
GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白
CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)試劑盒 ,英文名: AIF ELISA Kit
Porcine orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 豬食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒
大豆特定基因序列(Lectin)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforLTB(HumanlymphotoxinBeta)ELISAKit人淋巴毒素β
體液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitHSP-20雞熱休克蛋白20
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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