服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
全國統(tǒng)一服務(wù)熱線：
15201736385
產(chǎn)品中心您當(dāng)前的位置：首頁 > 產(chǎn)品中心 > 原代細(xì)胞 > 大鼠原代細(xì)胞 > 大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白脫氫酶抗體 OTOP2蛋白抗體 大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 小鼠晶狀體上皮細(xì)胞 人卵巢癌細(xì)胞；3AO Sf9 (昆蟲卵巢細(xì)胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：59
更新時間：2024-10-29
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7369 |
細(xì)胞簡介：
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有不同的特性，在腦和視網(wǎng)膜中，這些內(nèi)皮細(xì)胞具有內(nèi)屏障的功能，在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài)，釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用，體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人過氧化酶(GSH-Px)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人(GSH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人17-類固醇(17-KS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytovillin / Ezrin protein (cytovillin/ezrin) ELISA Kit 人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)試劑盒
HumanSS-A/RoaibodyELISAKit 人抗SS-A/Ro抗體試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4試劑盒人周期素依賴性激酶4(CDK-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織GRK5激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanpolymyositis-sclerosisaibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit人抗多發(fā)性肌硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
蛋白酶體抑制劑亞基PI31抗體
鞘脂激活蛋白原抗體
ICOS重組小鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
α2-巨球蛋白(α2M)重組蛋白 Recombinant Alpha-2-Macroglobulin (a2M)
HNRNPR重組人 HNRNPR / HNRNP-R / HNRNP R 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白
CDH18 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 蛋白
甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白 Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)
IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白
AKT3重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標(biāo)簽) Protein
FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白
CDH1重組人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞人孕酮受體(PGR)ELISA 試劑盒
Human tumor vascular endothelial growth factor (TAF) ELISA Kit 人腫瘤血管生長因子(TAF)試劑盒
HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2試劑盒人胰島素樣生長因子2(IGF-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
HumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
