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廠商性質:經(jīng)銷商
訪問量:51
更新時間:2024-10-29
大鼠胸腺上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胸腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7445 |
細胞簡介:
大鼠胸腺上皮分離自胸腺組織;胸腺是機體重要的淋巴器官,其功能與免疫緊密相關,是T細胞分化、發(fā)育、成熟的場所,還可以分泌胸腺激素及激素類物質,具有內(nèi)分泌技能的器官。胸腺上皮細胞和胸腺細胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分,其外,胸腺上皮細胞組成了胸腺細胞不同發(fā)育階段的三維結構,根據(jù)其在胸腺中位置不同,可分為皮質胸腺上皮細胞和髓質胸腺上皮細胞。胸腺細胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質和髓質上皮細胞的遷移過程中相互作用完成的。此外,胸腺細胞通過皮質胸腺上皮細胞介導的陽性選擇和髓質胸腺上皮細胞介導的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復合體和自身抗原的成熟T淋巴細胞。胸腺上皮細胞是構成胸腺微環(huán)境的主要成份,其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達具有高度異質性,與胸腺細胞結合成不同類型復合體,部分胸腺上皮細胞相互排列構成囊泡樣結構。電鏡觀察,可把胸腺上皮細胞分為3-6型,用抗胸腺上皮細胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細胞分為9種類型。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠胸腺上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠胸腺上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
上腺素 英文名稱: Adrenalin/ 英文縮寫: ADR 規(guī)格:
晚期糖基化終末產(chǎn)物 英文名稱: advanced glycosylation end products 英文縮寫: AGEs 規(guī)格:
0酸化AKT蛋白 英文名稱: phosphorylation AKT 英文縮寫: p-AKT 規(guī)格:
轉錄因子AP-1 英文名稱: anscription Factors AP-1 英文縮寫: AP-1 規(guī)格:
豚鼠腎素(Renin)試劑盒 ,英文名: Renin ELISA Kit
Human dengue fever aibody (DF-Ab) ELISA Kit 人登革熱抗體(DF-Ab)試劑盒
MonkeyLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit白三烯C4(LTC4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBK(Mousebradykinin)ELISAKit小鼠血管舒緩激肽
細菌尼羅紅染色試劑盒100次
RabbitLysozyme,LZMELISAKit兔(LZM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
骨成型蛋白受體1A抗體
絲/蘇蛋白激酶vrk2抗體
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182 0.5mgphospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 0酸化原活化蛋白激酶p38抗原
UCHL3重組人 UCHL3 / UCH-L3 蛋白 Protein
IL15 Protein Human 重組人 IL-15 / IL15 / Interleukin 15 蛋白
PVRL2 Protein Human 重組人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白
phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182 0.5mgphospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 0酸化原活化蛋白激酶p38抗原
IL15 Protein Human 重組人 IL-15 / IL15 / Interleukin 15 蛋白
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PVRL2 Protein Human 重組人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白
UCHL3重組人 UCHL3 / UCH-L3 蛋白 Protein
大鼠胸腺上皮細胞大鼠轉縮酶(TALDO1)試劑盒 ,英文名: TALDO1 ELISA Kit
Mice of aithrombin III (AT- III) aibody ELISA Kit 小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒
Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISAKit 小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit人白血病抑制因子
氨基酸補充溶液(10X)100毫升
ELISAKitATGA/TGAB大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體