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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白21抗體 F-box蛋白38抗體 環(huán)指蛋白130抗體 人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 人支氣管平滑肌細(xì)胞 SNU-175人結(jié)腸癌細(xì)胞 PA-1 (人卵巢畸胎瘤細(xì)胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：52
更新時間：2024-10-30
產(chǎn)品特性Product characteristics
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7409 |
細(xì)胞簡介：
人視網(wǎng)膜色素上皮分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多。層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力。視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道；主要是由單層色素上皮細(xì)胞所構(gòu)成，排列十分規(guī)則。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。細(xì)胞呈多角形，細(xì)胞分為三部分，即頂部、體部和基底部。視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞無再生能力，細(xì)胞死亡后不被替換，而是鄰近的細(xì)胞向側(cè)面滑動，以填補(bǔ)死亡細(xì)胞遺留下來的空間。視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。
方法簡介：
公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜色素上皮經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
血小板活化因子 (PAF) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T
血小板衍化生長因子 -AA(PDGF-AA) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
血小板衍化生長因子 -AB(PDGF-AB) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
血小板衍化生長因子 -BB(PDGF-BB) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai hepatitis B virus e aibody (HBeAb) ELISA Kit 人抗乙型肝病毒e抗體(HBeAb)試劑盒
HumanexteinELISAKit 人外顯肽(extein)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforABAb(Humanai-braiissueaibody)ELISAKit人抗腦組織抗體
(0.05%)乙四乙酸混合液100毫升
Mouseneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒規(guī)格：96T/48T
脂肪酸合成酶抗體
TRIM16蛋白抗體
NA重組甲型流感 H5N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
Ractopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物 1mgRactopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物
GFRA2重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 Protein
CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
Ractopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物 1mgRactopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物
CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白
NA重組甲型流感 H5N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
GFRA2重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 Protein
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞大鼠釋放激素(GH)試劑盒 ，英文名： GH ELISA Kit
Porcine tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒
ELISA 小鼠腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子受體(mouse BDNF R) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforL-LDHELISAKit大鼠L-鼠乳酸脫氫酶
通用型EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitBF雞B因子
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
