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更新時(shí)間:2024-10-30
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產(chǎn)品名稱:人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞
組織來(lái)源:胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一種多能干細(xì)胞,是具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下,它可以分化成多種功能細(xì)胞像APSC多能細(xì)胞。在胚胎發(fā)育中來(lái)源于中胚層。在機(jī)體正常的組織損傷修復(fù)過程中,MSC是一種重要的參與組織再生的細(xì)胞庫(kù)。在組織損傷引起的特殊信號(hào)作用下,MSC遷移到受損部位,在局部聚集增殖,依據(jù)不同的損傷信號(hào)沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴(kuò)增,體外倍增能力旺盛,能保持其多向分化能力。因此,MSC是一種實(shí)用的組織修復(fù)種子細(xì)胞。相較于其他干細(xì)胞,胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞具有來(lái)源方便,細(xì)胞數(shù)量充足,易于分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增和純化,傳代擴(kuò)增多代后仍具有干細(xì)胞特性。胎盤是干細(xì)胞的最佳來(lái)源。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤間充質(zhì)干采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
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小鼠酶(CA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human follistatin (FS) ELISA Kit 人卵泡抑素(FS)試劑盒
Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit 人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
DeerEndothelialniicoxidesyhase,eNOS試劑盒內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞鈣交換體(NCX)蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEndothelin1,ET-1ELISAKit小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體
α輔助因子44抗體
HA重組甲型流感 H14N5 (A/Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PARP(poly ADP-ribose polymerase 0.5mgPARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二0酸多聚酶抗原
LYN重組人 Lyn Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
CHST11 Protein Human 重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白
BCAM Protein Human 重組人 BCAM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PARP(poly ADP-ribose polymerase 0.5mgPARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二0酸多聚酶抗原
CHST11 Protein Human 重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白
HA重組甲型流感 H14N5 (A/Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
BCAM Protein Human 重組人 BCAM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LYN重組人 Lyn Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠生長(zhǎng)分化因子5(GDF5)試劑盒 ,英文名: GDF5 ELISA Kit
Mouse vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 小鼠K1(VK1)試劑盒
Ratai-spermaibody,AsAbELISAKit 大鼠抗抗體(AsAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHcyELISAKit大鼠同型半胱
細(xì)胞VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
人高香草酸(HVA)ELISAKit人腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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