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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-05
小鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
軟骨 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8517 |
細胞簡介:
小鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨分離自顳下頜關(guān)節(jié)軟骨組織,顳下頜關(guān)節(jié)又稱顳頜關(guān)節(jié)"或下頜關(guān)節(jié)"。由下頜頭與顳骨下頜窩和關(guān)節(jié)結(jié)節(jié)組成,左右合成一聯(lián)合關(guān)節(jié),主理張口閉口和咀嚼運動。關(guān)節(jié)囊松弛,側(cè)方為內(nèi)、外側(cè)韌帶所加強。囊內(nèi)的關(guān)節(jié)盤呈卵圓形,由纖維軟骨組成,區(qū)分為前、中、后三部分。上面呈鞍狀,前凹后凸,與關(guān)節(jié)結(jié)節(jié)和下頜窩的凸凹輪廓相對應;下面凹正對下頜頭,周緣與關(guān)節(jié)囊相接,前緣與穿過關(guān)節(jié)囊的翼外肌腱相連。關(guān)節(jié)盤將關(guān)節(jié)腔分成上、下兩半。關(guān)節(jié)外更有蝶下頜韌帶(蝶棘至下頜小舌)和莖突下頜韌帶(莖突至下頜角)予以加固。關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,同時當受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配,也沒有血管,其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運動,使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關(guān)節(jié)運動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關(guān)節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關(guān)節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每3-4天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血小板膜糖蛋白 (GP IIb/IIIa) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
生長相關(guān)因子 (GRO) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
生長相關(guān)因子 α(GRO α) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
過氧化物酶 (GSH-Px) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
整合素α4(CD49d)抗體
Symplekin蛋白抗體
SELP重組大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 標簽) Protein
COMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原 0.5mgCOMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原
ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 Protein
CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白
SELL Protein Mouse 重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白
COMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原 0.5mgCOMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原
CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白
SELP重組大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 標簽) Protein
SELL Protein Mouse 重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白
ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 Protein
小鼠中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA pcr檢測試劑盒
Human ai insulin receptor aibody (AIRA) ELISA Kit 人抗胰島素受體抗體(AIRA)試劑盒
HumanArachidonicAcid,AAELISAKit 人花生四烯酸(AA)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforABCA1(HumanATP-bindingcassetteanspoerA1)ELISAKit人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1
伊文思藍(EVANSBLUE)植物細胞繁殖測定試劑盒100次
Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit小鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細胞大鼠釋放激素受體抗體(GHR-Ab)試劑盒 ,英文名: GHR-Ab ELISA Kit
Porcine ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒
ELISA 小鼠細胞凋亡相關(guān)基因(mouse BCL-2) 分裝
CLIAKitforLLO(HumanlisteriolysinO)ELISAKit人單核細胞增多性李斯特菌素O
通用型DNA氧化損傷AP位點比色法定量分析試劑盒20次
ELISAKitPAL雞L苯解氨酶
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行