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更新時(shí)間:2024-11-04
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞
組織來源:胃組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠胃黏膜上皮分離自胃黏膜組織;胃黏膜柔軟,活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞,充盈時(shí)變平坦。幽門處的黏膜形成環(huán)形皺襞,突向腔內(nèi)稱幽門瓣。胃黏膜可分為三層,即上皮層(單層柱狀上皮)、固有層(由結(jié)締組織構(gòu)成、含有大量的胃腺)和黏膜肌層(為薄層平滑肌、排列成內(nèi)環(huán)外縱)。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層,細(xì)胞為單層柱狀上皮,排列整齊,能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面,防止胃酸和對(duì)胃黏膜的損害。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子、藥物、激素對(duì)細(xì)胞的損傷、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡(jiǎn)單而的模型。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胃黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胃黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(mouse VEGF-B) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(mouse VEGF-C) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(mouse VEGF-D) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(mouse VEGF-R1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠纖維蛋白肽B(FPB)試劑盒 96T/48T
Human leucine aminopepridase (LAP) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒
Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit 人脂0壁酸(LTA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenfactorB,BF試劑盒雞B因子(BF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISAKit小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
26S蛋白酶體非ATP酶調(diào)節(jié)亞基11抗體
Tyrosine Hydroxylase
MPL重組大鼠 c-MPL / CD110 / TPOR 蛋白 Protein
E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein 0.5mgE.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein) DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白
LTF重組人 Lactotransferrin / LTF 蛋白 Protein
CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IFNAR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein 0.5mgE.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein) DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白
CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MPL重組大鼠 c-MPL / CD110 / TPOR 蛋白 Protein
IFNAR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
LTF重組人 Lactotransferrin / LTF 蛋白 Protein
小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒 ,英文名: LDL-IC ELISA Kit
Pig hea muscle oponin I (cTn- I) ELISA Kit 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒
鉤端核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLR/Ob-R(HumanLeptieceptor)ELISAKIT人苗條素受體
通用封阻緩沖液100毫升
ELISAKitAT-Ⅲ雞抗Ⅲ抗體