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更新時(shí)間:2024-11-05
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞
組織來(lái)源:淋巴結(jié)
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔淋巴結(jié)淋巴體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔淋巴結(jié)淋巴分離自淋巴結(jié);淋巴結(jié)是哺乳類的周圍淋巴器官,由淋巴細(xì)胞集合而成。呈豆形,位于淋巴管行進(jìn)途中,是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要器官之一。淋巴結(jié)表面包有被膜,被膜的結(jié)締組織伸入淋巴結(jié)內(nèi)形成小梁,構(gòu)成淋巴結(jié)的支架。被膜下為皮質(zhì)區(qū),淋巴結(jié)的中心及門(mén)部為髓質(zhì)區(qū)。皮質(zhì)區(qū)有淋巴小結(jié)、彌散淋巴組織和皮質(zhì)淋巴竇(簡(jiǎn)稱皮竇),髓質(zhì)包括由致密淋巴組織構(gòu)成的髓索和髓質(zhì)淋巴竇(簡(jiǎn)稱髓竇)。淋巴竇的竇腔內(nèi)有許多淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,從輸入淋巴管流來(lái)的淋巴液先進(jìn)入皮竇再流向髓竇,后經(jīng)輸出淋巴管離開(kāi)淋巴結(jié)。淋巴結(jié)的主要功能是濾過(guò)淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。淋巴結(jié)腫大或疼痛常表示其屬區(qū)范圍內(nèi)的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過(guò)淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng);當(dāng)局部感染時(shí),細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞是白細(xì)胞的一種,由次級(jí)淋巴器官淋巴結(jié)產(chǎn)生,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分;細(xì)胞為圓形細(xì)胞核,細(xì)胞質(zhì)少。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔淋巴結(jié)淋巴采用分離淋巴結(jié)組織、研磨獲取單細(xì)胞懸液后通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為1×106cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔淋巴結(jié)淋巴經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠胰島素(INS)試劑盒
小鼠原激活肽(TAP)試劑盒
小鼠(ypsin)試劑盒
小鼠合成酶(NOS)試劑盒
3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框20抗體
Verprolin同源結(jié)構(gòu)域包含蛋白3抗體
SDC1重組小鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白 Protein
Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原 0.5mgAkt/PKB 蛋白激酶B(抗原)
IL17A重組人 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
KIT Protein Rat 重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原 0.5mgAkt/PKB 蛋白激酶B(抗原)
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SDC1重組小鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白 Protein
KIT Protein Rat 重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL17A重組人 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat complexed prostate specific aigen (CPSA) ELISA Kit 大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)試劑盒
Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
Aflatoxin,AFT試劑盒霉毒素(AFT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
油脂DNA萃取試劑盒10次
MouseIerferonα,IFN-αELISAKit小鼠α干擾素(IFN-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞大鼠低密度脂蛋白(LDL-C)試劑盒 ,英文名: LDL-C ELISA Kit
Porcine angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒
菌核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLR/Ob-RELISAKit大鼠苗條素受體
通用抗體稀釋溶液10/100毫升
ELISAKitAmAC-1雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1