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更新時間:2024-11-04
小鼠神經(jīng)干細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 球形 | YS-01X7436 |
細胞簡介:
小鼠神經(jīng)干分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內(nèi)側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)干細胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經(jīng)干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細胞。需要強調(diào)的是,在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,不同的神經(jīng)干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同,分布也不同。神經(jīng)干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。神經(jīng)干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向神經(jīng)細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提。神經(jīng)干細胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成神經(jīng)球,神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長,予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細胞懸液,將部分細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中,2×105個細胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次,培養(yǎng)條件不變。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)干采用消化后差速貼壁,結合神經(jīng)干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%,Accutase
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血清低密度脂蛋白(LDL)測試盒 Two semi test case
血清高密度脂蛋白(HDL)測試盒 HCV test kit
葡萄糖(Glu)測試盒 Surface aigen (enzymatic method) test case
(半自動/手工) A test box
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai neuophil / cenosome aibody (ACA) ELISA Kit 人抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒
Humanai-OJ-aibody,OJ/IleRSELISAKit 人OJ抗體/抗異亮氨酰NA合成酶抗體(OJ/IleRS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforABeta1-42(Humanamyloidbetapeptide1-42)ELISAKit人β淀粉樣蛋白1-42
乙醇福爾馬林固著液(Formalin-Alcoholic)50毫升
MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit小鼠N-乙?;?span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
PRDM鋅指轉錄因子PRDM4抗體
ISLR2蛋白抗體
EFNA5重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)
IL36A重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白
AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
EFNA5重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白
IL36A重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein
小鼠神經(jīng)干細胞大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)試劑盒 ,英文名: SP-A ELISA Kit
Porcine soluble P selectin (sP-S 豬可溶性P選擇素(sP-S
豬特定基因序列(Porcine)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMAP-2(Humanmicrotubule-associatedprotein2)ELISAKit人微管相關蛋白2
體液氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)20次
ELISAKitIGFBP-3胰島素樣生長因子結合蛋白3
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