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廠商性質:經銷商
訪問量:799
更新時間:2024-11-05
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產品名稱:大鼠腎小球上皮細胞
組織來源:腎
產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠腎小球上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
大鼠腎小球上皮分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球上皮細胞是由間充質細胞分化發(fā)育、襯貼于腎小球血管腔的單層扁平上皮細胞,是腎小球的固有細胞之一,也是構成腎小球濾過膜的重要組成部分。腎小球上皮細胞的正常結構和功能是腎單位濾過及腎小球微環(huán)境穩(wěn)定的重要保障。腎小球濾過膜的最外層為上皮細胞層,厚約40nm,腎小球上皮細胞是腎小囊的臟層上皮細胞,貼附于腎小球血管外側基底膜上。上皮細胞又稱足細胞,足細胞的不規(guī)則突起為足突,其間有許多狹小間隙,血液經濾過膜過濾入腎小球囊。腎小球上皮細胞可通過合成和分泌腎上腺髓質肽抑制系膜細胞增殖,腎上腺髓質肽作為一種重要的旁分泌因子,可保持腎小球微環(huán)境穩(wěn)定,并參與腎小球的炎癥過程。體外培養(yǎng)的腎小球上皮細胞對各型腎小球腎炎具有重要的研究價值。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠腎小球上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠腎小球上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產品:
小鼠類胰島素生長因子-2 英文名稱: Insulin like Growth Factor 1 2 規(guī)格: 英文縮寫: IGF-2
小鼠類胰島素生長因子結合蛋白-1 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-1 規(guī)格: 英文縮寫: IGFBP-1
小鼠類胰島素生長因子結合蛋白-2 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-2 規(guī)格: 英文縮寫: IGFBP-2
小鼠類胰島素生長因子結合蛋白-3 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-3 規(guī)格: 英文縮寫: IGFBP-3
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Rat hexokinase (HK) ELISA Kit 大鼠己糖激酶(HK)試劑盒
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卵泡抑素相關蛋白1抗體
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CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白
IL18R1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽)
CGA(Chromogranin A 0.5mgCGA(Chromogranin A) 嗜鉻粒素A抗原
CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白
FSTL3重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 Protein
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IL36B重組人 IL36B / IL1F8 蛋白 Protein
大鼠腎小球上皮細胞大鼠白介素3(IL-3)試劑盒 ,英文名: IL-3 ELISA Kit
Mouse soluble ierleukin 2 receptor beta chain (IL-2sR beta) ELISA Kit 小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒
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CLIAKitforINH-B(HumaninhibinB)ELISAKit人抑制素B
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ELISAKitFree-T3大鼠游離三甲狀腺原
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