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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
雞卵泡顆粒細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
雞卵泡顆粒細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：L-2-羥戊二酸脫氫酶(L2HGDH)檢測(cè)試劑盒雞外周血淋巴細(xì)胞Lacritin蛋白(LACRT)檢測(cè)試劑盒人肺微血管平滑肌Ladinin1蛋白(LAD1)檢測(cè)試劑盒小鼠支氣管上皮細(xì)胞Laforin蛋白(LDE)檢測(cè)試劑盒豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Lebercilin蛋白(LCA5)檢測(cè)試劑盒大鼠支氣管上皮細(xì)胞Lengsin蛋白(LGSN)檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：105
更新時(shí)間：2024-10-24
產(chǎn)品特性Product characteristics
雞卵泡顆粒細(xì)胞
商品屬性：
| 組織來(lái)源 | .產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
| 雞卵泡組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X6992 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
雞卵泡顆粒分離自雞卵泡組織；成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞緊靠卵泡顆粒層，與顆粒層細(xì)胞之間有一層基膜相隔，內(nèi)膜細(xì)胞呈多邊形，胞質(zhì)清亮，胞核圓形，細(xì)胞間可見(jiàn)許多毛細(xì)血管，外膜細(xì)胞位于最外層，多呈梭形，與周圍結(jié)締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞，在卵泡開(kāi)始發(fā)育、卵細(xì)胞成長(zhǎng)的同時(shí)，周圍的菱形細(xì)胞變?yōu)榱⒎叫危⒂蓡螌釉錾蓮?fù)層，因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒，故稱為顆粒細(xì)胞。初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞為單層；次級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞增至復(fù)層；成熟卵泡的顆粒細(xì)胞展開(kāi)又變?yōu)閱螌印ｎw粒細(xì)胞的胞核大而圓，著色深，細(xì)胞的游離面有許多細(xì)長(zhǎng)突起伸入放射帶的凹陷部。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞卵泡顆粒采用先機(jī)械分離后膠原酶 -聯(lián)合消化法、并通過(guò)專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞卵泡顆粒細(xì)經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
傳代特性可傳1代
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
| Reprimo蛋白(RPRM)檢測(cè)試劑盒 | 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞 |
| REST輔抑制因子1(RCOR1)檢測(cè)試劑盒 | 豬脂肪細(xì)胞 |
| REST輔抑制因子2(RCOR2)檢測(cè)試劑盒 | 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞 |
| REST輔抑制因子3(RCOR3)檢測(cè)試劑盒 | 兔視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 |
| RET原癌基因(RET)檢測(cè)試劑盒 | 雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
| R-脊椎蛋白1(RSPO1)檢測(cè)試劑盒 | 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
| R-脊椎蛋白2(RSPO2)檢測(cè)試劑盒 | 小鼠氣管上皮細(xì)胞 |
| R-脊椎蛋白3(RSPO3)檢測(cè)試劑盒 | 豬前脂肪細(xì)胞 |
| R-脊椎蛋白4(RSPO4)檢測(cè)試劑盒 | 大鼠氣管上皮細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白(S100)檢測(cè)試劑盒 | 兔晶狀體上皮細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)檢測(cè)試劑盒 | 雞胚成纖維細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)檢測(cè)試劑盒 | 人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13)檢測(cè)試劑盒 | 小鼠氣管平滑肌細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A14(S100A14)檢測(cè)試劑盒 | 豬內(nèi)皮細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A2(S100A2)檢測(cè)試劑盒 | 大鼠氣管平滑肌細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A5(S100A5)檢測(cè)試劑盒 | 兔肌腱干細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)檢測(cè)試劑盒 | 雞前脂肪細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)檢測(cè)試劑盒 | 雞卵泡顆粒細(xì)胞人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)檢測(cè)試劑盒 | 小鼠肺成纖維細(xì)胞 |
| S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)檢測(cè)試劑盒 | 豬成骨細(xì)胞 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
