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產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-10-27
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產(chǎn)品名稱:大鼠NG2細(xì)胞
組織來(lái)源:腦組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠NG2分離自腦組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。NG2細(xì)胞是在發(fā)育和成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)和白質(zhì)束中發(fā)現(xiàn)的,因表達(dá)NG2蛋白多糖而得名。NG2細(xì)胞先前被假定代表少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞,后來(lái)使用轉(zhuǎn)基因的研究表明,NG2細(xì)胞在體內(nèi)不僅能夠產(chǎn)生少突膠質(zhì)細(xì)胞,還能產(chǎn)生原漿性星形膠質(zhì)細(xì)胞以及某些情況下的神經(jīng)元。NG2細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中不同于神經(jīng)元、成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的一類細(xì)胞亞群。此外,在發(fā)育和成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多個(gè)區(qū)域,發(fā)現(xiàn)NG2細(xì)胞和神經(jīng)元之間存在的突觸聯(lián)系,暗示NG2細(xì)胞除了可能作為分化成多種細(xì)胞的可塑性前體細(xì)胞群,還可能會(huì)和神經(jīng)元聯(lián)系從而形成一個(gè)的神經(jīng)膠質(zhì)網(wǎng)絡(luò)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠NG2采用消化、專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠NG2經(jīng)NG2免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠仙臺(tái)病毒(Sendai)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
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HumanNa+/H+exchanger3,NHE3ELISAKit 人Na+/H+交換體3(NHE3)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體
NOMO蛋白抗體
F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白
IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) Protein
CDK2AP2 Protein Human 重組人 CDK2AP2 蛋白
CDNF Protein Mouse 重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白
GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白
CDK2AP2 Protein Human 重組人 CDK2AP2 蛋白
F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CDNF Protein Mouse 重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白
IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) Protein
大鼠NG2細(xì)胞豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA檢測(cè)試劑盒
People four arachidonic acid (AA) ELISA Kit 人花生四烯酸(AA)檢測(cè)試劑盒
RabbitPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAPC(HumanactivatedproteinC)ELISAKit人活化蛋白C
血清脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit豬白介素3(IL-3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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