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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
大鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：G蛋白偶聯(lián)受體C5家族亞型D抗體 擬南芥IKI3抗體 鼻咽上皮細(xì)胞特異性蛋白1抗體 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 小鼠胸腺上皮細(xì)胞 SDOW-17小鼠雜交瘤 A2058 (人皮膚癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：71
更新時間：2024-10-29
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 巨噬細(xì)胞樣 | YS-01X7442 |
細(xì)胞簡介：
大鼠骨髓來源巨噬分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對病原體作出反應(yīng)。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠骨髓來源巨噬采用分離骨髓單個核細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)分化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠骨髓來源巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 試劑盒因（12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
植物E試劑盒 植物E試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 植物E試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：植物E試劑盒、植物E 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒 豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人chemerin試劑盒 人chemerin試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人chemerin試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人chemerin試劑盒、人chemerin 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人12羥二十烷四烯酸試劑盒 人12羥二十烷四烯酸試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人12羥二十烷四烯酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人12羥二十烷四烯酸試劑盒、人12羥二十烷四烯酸試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒
Human ai spindle aibody (MSA) ELISA Kit 人抗紡錘體抗體(MSA)試劑盒
Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAGEsELISAKit大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物
血液腎素(renin)熒光定量試劑盒20次
MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒
9號染色體開放閱讀框71抗體
端粒保護(hù)蛋白1抗體
HA重組甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配對盒基因8抗原
TRIB3重組人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
AFM Protein Human 重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BMPR1A Protein Human 重組人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配對盒基因8抗原
AFM Protein Human 重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BMPR1A Protein Human 重組人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
TRIB3重組人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA 試劑盒
Rat ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒
HumanCailageglycoprotein39,HCgp-39ELISAKit 人軟骨糖蛋白39(HCgp-39)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1Ab試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)試劑盒
植物谷氨酰半胱合成酶(glamylsysteinesyhetase)活性比色法定量試劑盒20次
Humanβ-glucuronidase，βGDELISAKit人β葡萄糖酸苷酶(βGD)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
