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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：H2A組蛋白家族E蛋白抗體 EMSY蛋白抗體 NIPSNAP3B蛋白抗體 大鼠角膜上皮細(xì)胞 小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 人肺鱗癌細(xì)胞；LTEP-S MDA-MB-361 (人乳腺癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：56
更新時(shí)間：2024-10-29
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
脊髓組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | YS-01X7451 |
細(xì)胞簡介：
大鼠脊髓神經(jīng)元分離自脊髓組織；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù)；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對(duì)的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對(duì)的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動(dòng)的低級(jí)中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對(duì)脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元，即神經(jīng)細(xì)胞，其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體，內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個(gè)有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起，能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動(dòng)，突起的大小和形態(tài)各不相同，很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內(nèi)含有大量膠質(zhì)細(xì)胞，神經(jīng)元含量少，分離純化難度大，且脊髓神經(jīng)元細(xì)胞是高度分化的終末細(xì)胞，不能分裂增殖，培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓神經(jīng)元呈圓形，體積小，透亮，無突起。培養(yǎng)2-3d，可見胞體增大，突起增多延長；培養(yǎng)6-7d，細(xì)胞體大飽滿，突起明顯增加延長并交織成網(wǎng)，光暈明顯，立體感強(qiáng)。培養(yǎng)20d后，死亡細(xì)胞明顯增加，細(xì)胞出現(xiàn)內(nèi)空泡，突起粗細(xì)不均，甚至脫壁，發(fā)生細(xì)胞崩解。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)元采用膠原酶&聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人組織多肽抗原(TPA)試劑盒 96T/48T
人組織蛋白去乙?；?span>(HD)試劑盒 96T/48T
人組織蛋白酶抗體(CathAb)試劑盒 96T/48T
人組織蛋白酶S(cath-S)試劑盒 96T/48T
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 ，英文名： MMP-9 ELISA Kit
Human apoptosis signal regulating kinase I (ASK-1) ELISA Kit 人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒
MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit 猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6
細(xì)菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒20次
RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit兔子白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
EPB41L5蛋白抗體
過氧化氫酶重組鼠單克隆抗體
MDGA2重組小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein
BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關(guān)蛋白(抗原)
LRP10重組人 LRP10 蛋白 Protein
IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 標(biāo)簽)
CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關(guān)蛋白(抗原)
IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 標(biāo)簽)
MDGA2重組小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein
CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LRP10重組人 LRP10 蛋白 Protein
大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒
Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人3(VD3)試劑盒
HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗體(AOAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancholecystokinin,CCK試劑盒人膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒規(guī)格：96T/48T
紫外可見光分析20樣本
HumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素(Secretin)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
