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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-29
大鼠毛囊干細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
毛囊 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7857 |
細(xì)胞簡介:
大鼠毛囊干分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊干細(xì)胞是在毛囊外根鞘隆突部中的一種細(xì)胞。毛囊干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,在體內(nèi)處于靜止?fàn)顟B(tài),在體外培養(yǎng)作用下表現(xiàn)出驚人的增殖能力。研究發(fā)現(xiàn),毛囊干細(xì)胞具有多向分化潛能,它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺,參與皮膚創(chuàng)傷愈合的過程。毛囊干細(xì)胞和其它成體干細(xì)胞一樣,具有慢周期性、未分化性、自我更新和體外增殖能力強等特點。毛囊干細(xì)胞分化經(jīng)毛囊干細(xì)胞(hair follicle stem cells,FSC)、短暫增殖細(xì)胞(transit amplifying cells,TAC)有絲分裂后分化細(xì)胞(postmitotic differentiating cells,PDC)三個階段。毛囊干細(xì)胞在光鏡下呈立方形,細(xì)胞體積小,核漿比率大,表面光滑,皺褶少,又被稱為非鋸齒形細(xì)胞,細(xì)胞體積的增大與增殖能力呈負(fù)相關(guān)。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞表面有少許微絨毛,細(xì)胞核存在許多卷曲,染色質(zhì)彌散分布,這些形態(tài)特征均表現(xiàn)出原始細(xì)胞的特性。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠毛囊干采用膠原酶 - 聯(lián)合消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠毛囊干經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠毛囊干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
山羊壞死因子α試劑盒 山羊壞死因子α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 山羊壞死因子α試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:山羊壞死因子α試劑盒、山羊壞死因子α 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
山羊生長激素釋放多肽試劑盒 山羊生長激素釋放多肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 山羊生長激素釋放多肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:山羊生長激素釋放多肽試劑盒、山羊生長激素釋放多肽試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
山羊白介素4試劑盒 山羊白介素4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 山羊白介素4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:山羊白介素4試劑盒、山羊白介素4 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
山羊白介素10試劑盒 山羊白介素10試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 山羊白介素10試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:山羊白介素10試劑盒、山羊白介素10 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豚鼠內(nèi)皮型合酶(NOS3)試劑盒 ,英文名: NOS3 ELISA Kit
Human replication protein A (RPA-70) ELISA Kit 人復(fù)制蛋白A(RPA-70)試劑盒
Rabbitsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBAX(RabbitBcl-2AssaciatedXprotein)ELISAKit兔Bcl-2相關(guān)X蛋白
線蟲β-半乳糖苷酶比色法定量試劑盒20次
rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
JAZF1抗體
甲基化樣蛋白7A抗體
CXCL13重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 Protein
Morphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 10mgMorphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物
DAPK3重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白
PREP Protein Mouse 重組小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白
Morphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 10mgMorphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物
IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白
CXCL13重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 Protein
PREP Protein Mouse 重組小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白
DAPK3重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠毛囊干細(xì)胞豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒 ,英文名: ACTH ELISA Kit
Many people immunoglobulin receptor (poly-IgR) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒
rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-HexA(MouseBeta-hexosaminidaseA)ELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A
細(xì)菌細(xì)胞色素氧化酶活性比色法定量試劑盒20次
rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit兔子透明質(zhì)酸(HA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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