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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞

產(chǎn)品簡介:

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞公司正在出售的產(chǎn)品:乙酰化組蛋白H2A抗體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凝集素1抗體 NUP54抗體 大鼠腎動脈平滑肌細胞 小鼠腦膜細胞 人高分化脂肪肉瘤細胞;94T778 16HBE (人支氣管上皮樣細胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:58

更新時間:2024-10-29

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

腦組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

雙極、多極形

YS-01X7717

細胞簡介:

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標本中,少突膠質(zhì)細胞比星狀膠質(zhì)細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質(zhì)細胞或寡突膠質(zhì)細胞。少突膠質(zhì)細胞(oligodendrocyte)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細胞,其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細胞祖細胞、前少突膠質(zhì)細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細胞等階段。有學者將少突膠質(zhì)細胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是,細胞發(fā)育是一個連續(xù)的過程,其形態(tài)、表達產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴格的界限,因此,其分類是相對的。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質(zhì)細胞又稱前O2Apre-O2A progenitor cell)。細胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養(yǎng)時成簇生長在星形膠質(zhì)表面,具有很強的分裂增殖潛力,表達GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細胞胞體常有雙極或三極突起,極少數(shù)為單極突起,直徑約7μm,有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時為雙潛能細胞,既可分化為少突膠質(zhì)細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),故又稱為少突膠質(zhì)細胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cellO2A)。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達GD3GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體),故常用A2B5抗體標記O2A。Ⅲ型少突膠質(zhì)細胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細胞。直徑約10μm。根據(jù)其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細胞。不成熟的OL胞體常伸出45條較粗大突起,表面還殘留有A2B5標記物,同時也表達O1-O4抗原,無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細胞突起有如蜘蛛網(wǎng),大量表達半乳糖腦苷脂(galactocerebro side,GC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,PLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)等,有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細胞前體細胞(簡稱少突膠質(zhì)細胞前體細胞)包括前O2AO2A和未成熟少突膠質(zhì)細胞,前兩者具有增殖能力。

方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)采用消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基 含B-27、PDGF、bFGFPenicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次;

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 雙極、多極形

傳代特性 不傳代,不增殖,存活1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

人著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CENPB (Cenomere Protein B) ELISA Kit

人中心體蛋白110(CEP110)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit

人酶VB(CA5B)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit

人絲切蛋白1(CFL1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit

豚鼠白介素4(IL4)試劑盒 ,英文名: IL4 ELISA Kit

Human stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 人干細胞因子受體(SCFR)試劑盒

rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAVP(Humanargininevasopressin)ELISAKit人精加壓素

線粒體蛋白印跡電泳內(nèi)參蛋白抗體(1000)20微克

Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit兔子抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

ZYG11BL蛋白抗體

磷酸化原癌基因c-Raf抗體

FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein

HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽)

CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白

HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原

IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽)

FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein

CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞兔兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒

Human ypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 人原激活肽(TAP)試劑盒

Humanmorbillivirus,MVELISAKit 人麻疹病毒(MV)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanglathione,GSH試劑盒人(GSH)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織單胺氧化酶B(MAO-B)活性熒光定量試劑盒20

Humanmorbillivirus,MVELISAKit人麻疹病毒(MV)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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