服務熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:60
更新時間:2024-10-29
大鼠終板軟骨細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
椎間盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7472 |
細胞簡介:
大鼠終板軟骨分離自椎間盤終板軟骨組織;椎體終板是椎體在生長發(fā)育過程中,椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,呈輕度凹陷,即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋,并終生存在,即為軟骨終板,上下軟骨終板與髓核和纖維環(huán)連接共同構成椎間盤。椎體終板構成了椎間盤的上下邊界,位于椎體中心的松質(zhì)骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當?shù)母采w其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體,同時具有平衡分散應力的作用。成熟的終板軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些終板軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,終板軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,終板軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的終板軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠終板軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化并結合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠終板軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠CD34(mouse CD34) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(mouse sCD40L) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠補體C3a(mouse C3a) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠補體C5a(mouse C5a) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISA 試劑盒
Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 2 (Eotaxin 2/CCL24) ELISA Kit 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)試劑盒
Humanβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)試劑盒 進口分裝
Humanai-thymocyteglobulin,ATG試劑盒人抗細胞球蛋白(ATG)試劑盒
植物線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次
Humanansthyretin,TELISAKit人轉甲狀腺素蛋白(T)試劑盒
卷曲螺旋結構域蛋白62抗體
小鼠抗人CD19單克隆抗體
FCGRT & B2M重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
雌激素受體β(ERβ)重組蛋白 Recombinant Estrogen Receptor Beta (ERb)
EPHA2重組人 EphA2 蛋白 (His 標簽) Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標簽)
CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白
ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 0.5mgADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬基質(zhì)蛋白酶(抗原)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標簽)
FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein
CHODL Protein Rat 重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (His 標簽)
SULT1A3重組人 SULT1A3 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠終板軟骨細胞大鼠整合素α2(ITGα2)試劑盒 ,英文名: ITGα2 ELISA Kit
Mouse granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒
MouseIerleukin15,IL-15ELISAKit 小鼠白介素15(IL-15)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit人谷脫羧酶
物理法冰凍切片抗原修復處理試劑盒50次
ELISAKitPTHrP大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
上一篇:大鼠直腸平滑肌細胞
下一篇:大鼠主動脈內(nèi)皮細胞