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訪問(wèn)量:59
更新時(shí)間:2024-10-30
人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
結(jié)腸癌組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7431 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人結(jié)腸癌組織源分離自患有結(jié)腸癌病人的結(jié)腸癌組織;結(jié)腸癌是常見(jiàn)的發(fā)生于結(jié)腸部位的消化道惡性腫瘤,好發(fā)于直腸與乙狀結(jié)腸交界處,以40~50歲年齡組發(fā)病率最高,男女之比為2~3:1。發(fā)病率占胃腸道腫瘤的第3位。結(jié)腸癌主要為腺癌、黏液腺癌、未分化癌。大體形態(tài)呈息肉狀、潰瘍型等。結(jié)腸癌可沿腸壁環(huán)行發(fā)展,沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤(rùn),除經(jīng)淋巴管、血流轉(zhuǎn)移和局部侵犯外,還可向腹腔內(nèi)種植或沿縫線、切口面擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。慢性結(jié)腸炎患者、結(jié)腸息肉患者、男性肥胖者等為易感人群。人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學(xué)研究等,還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人結(jié)腸癌組織源經(jīng)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠GRO(mouse GRO) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍化營(yíng)養(yǎng)因子(mouse GDNF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠生長(zhǎng)因子(mouse GH) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子3(mouse GATA3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human growth hormone releasing factor (GH-RF) ELISA Kit 人生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)試劑盒
Humahymopein,TP-5ELISAKit 人五肽(TP-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-rubellavirusIgGaibody,ai-RVIgG試劑盒人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體(ai-RVIgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞周期G1期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humaubularbasememembraneaibogy,TBMELISAKit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
生發(fā)中心激酶樣激酶抗體
AF488標(biāo)記人CD16單克隆抗體
SMAD3重組小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
高遷移率族蛋白1(HMG1)重組蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
CD200R1L Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200RLa 蛋白
高遷移率族蛋白1(HMG1)重組蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
SMAD3重組小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CD200R1L Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200RLa 蛋白
SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞大鼠心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)試劑盒 ,英文名: CLCF1 ELISA Kit
Mouse heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒
MouseFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanai-macrophageaibodyELISAKit人抗巨噬細(xì)胞抗體
細(xì)胞FLT3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitGRH大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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