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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:73
更新時(shí)間:2024-10-30
人口腔上皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
口腔黏膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7604 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人口腔上皮分離自口腔黏膜組織;口腔上皮細(xì)胞是一種上皮細(xì)胞,呈扁平、多邊形,形狀不規(guī)則。口腔各壁都有黏膜覆蓋,口腔上皮細(xì)胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。上皮的垂直切面上,細(xì)胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細(xì)胞為矮柱狀,為具有增殖分化能力的干細(xì)胞,部分子細(xì)胞向淺層移動(dòng)?;讓右陨鲜菙?shù)層多邊形細(xì)胞,再上為幾層梭形或扁平細(xì)胞。僅靠近表面幾層細(xì)胞為扁平狀,基底層細(xì)胞能不斷分裂增生,以補(bǔ)充表層衰老或損傷脫落的細(xì)胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的毛細(xì)血管,有利于復(fù)層扁平上皮的營(yíng)養(yǎng)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人口腔上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人口腔上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠(FA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)試劑盒
Humanheparansulfate,HSELISAKit 人硫酸類肝素(HS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Cheraxquadricarinatuslipovitellin/vitellin,Lv/Vn試劑盒紅螯光殼螯蝦卵黃脂0蛋白/卵黃0蛋白(Lv/Vn)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原生質(zhì)酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20次
MouseIgMELISAKit小鼠IgM試劑盒規(guī)格:96T/48T
雙微體2癌基因結(jié)合蛋白抗體
AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體
ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)
MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白
CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)
CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白
ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人口腔上皮細(xì)胞大鼠腺苷A1受體(ADORA1)試劑盒 ,英文名: ADORA1 ELISA Kit
Pla vitamin C (VC) ELISA Kit 植物C(VC)試劑盒
Mousebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 小鼠腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanamyloidbetapeptide1-40,ABeta1-40ELISAKit人β淀粉樣蛋白1-40
細(xì)胞HCK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitE大鼠雌激素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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