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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-11-04
兔胰島細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
胰腺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7875 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔胰島分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細(xì)胞作為糖尿病新藥的細(xì)胞篩選模型需保持其結(jié)構(gòu)完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長(zhǎng)的存活時(shí)間。胰島占胰腺總質(zhì)量的1%-2%,每個(gè)胰島大概含有1000個(gè)細(xì)胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴(yán)重低血糖癥狀,具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點(diǎn),是最有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結(jié)果鑒定等步驟,分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰島采用膠原酶灌注消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰島經(jīng)DTZ染色檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胰島體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
鴨病毒性腸病毒(DEV)試劑盒 96T/48T
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T
鴨白介素6(IL-6)試劑盒 96T/48T
鴨白介素4(IL-4)試劑盒 96T/48T
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai zona pellucida aibody (aZP) ELISA Kit 人抗透明帶抗體(aZP)試劑盒
Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit 人γ谷氨酰半胱合成酶(γ-ECS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACA-IgM(Mouseai-cardiolipinaibodyIgM)ELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgM
藥品糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量試劑盒20次
Mouseoxytocin,OTELISAKit小鼠催產(chǎn)素(OT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNA交聯(lián)修復(fù)蛋白1C抗體
生物鐘蛋白3抗體
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor 0.5mgLH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黃體生成素受體抗原
RTN4重組人 RTN4 / NOGO-A 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
CASQ1 Protein Human 重組人 Calsequestrin-1 / CASQ1 蛋白
CTSS Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin S / CTSS 蛋白
LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor 0.5mgLH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黃體生成素受體抗原
CASQ1 Protein Human 重組人 Calsequestrin-1 / CASQ1 蛋白
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CTSS Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin S / CTSS 蛋白
RTN4重組人 RTN4 / NOGO-A 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
兔胰島細(xì)胞大鼠肌紅蛋白(MB)試劑盒 ,英文名: MB ELISA Kit
Rabbit 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒
對(duì)蝦皮下和造血器官壞死病毒(HHNV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMouseoponi,Tn-TELISAKit小鼠肌鈣蛋白T
體液鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKit8-OHdG人8羥基脫氧鳥苷
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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